不锈钢发酵罐中有害微生物的控制方法

不锈钢发酵罐中有害微生物的控制包括培养基灭菌、无菌空气的制备、发酵系统的密闭措施和生产环境的灭菌或消毒等多个方面的内容，需要合适的灭菌方法加以依托。发酵罐灭菌方法有很多，可分为物理法和化学法两大类。物理法包括加热灭菌、辐射灭菌和介质过滤除菌法，化学法主要是利用化学物质灭菌。
常用的无菌技术和方法主要有以下几种，可根据灭菌的对象和要求选用不同方法。
一、干热灭菌法
1.火焰灭菌法
火焰灭菌法即利用火焰直接将微生物烧死，主要用于金属接种工具、试管口、锥形瓶口、接种行色匆匆 液管和滴管外部及无用的污染物（如称量化学诱变剂的称量纸）等的灭菌。对金属小镊子、小刀、玻璃涂棒、载玻片、盖玻片灭菌时，应先将其浸泡在75%酒精溶液中，使用时从酒精溶液中取出来，迅速通过火焰，瞬间灼烧灭菌。该方法简单，灭菌彻底，但适用范围有限。
2.干热空气灭菌法
干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿热气体穿透的油脂等方面的灭菌，不适合橡胶，塑料及大部分药品的灭菌。
在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强，必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此，干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果，通常采用以下几种方法：135~140℃灭菌3~5h；160~170℃灭菌2~4h；180~200℃灭菌0.5~1h。
二、湿热灭菌法
湿热灭菌法是指用饱和水蒸汽、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，具有很强的穿透能力，而且在冷凝时会放出大量热能，使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键，特别是氢键受到破坏，引起不可逆的变性，造成微生物死亡。从灭菌的效果来看，干热灭菌不如湿热灭菌有效，干热灭菌温度每升高10℃时，灭菌速率常数仅增加2~3倍；而湿热灭菌对耐热芽孢的灭菌速率常数增加的倍数可达到8~10倍，对营养细胞则速率常数增加得更高（通常湿热灭菌条件为121℃，维持30min）。所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高且经济实惠，是生产上最常用的灭菌方法，已被广泛用于工业生产中大量培养基、设备、管路及阀门的灭菌。影响湿热灭菌方法的主要因素有：微生物的各类与数量、蒸汽的性质和灭菌时间等。湿热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法和间歇蒸汽灭菌法。
1.煮沸灭菌法
煮沸灭菌法即将水煮沸至100℃，保持5~10min可杀死细菌繁殖体，保持1~3h可杀死芽孢。在水中加入1~2%的碳酸氢钠时沸点可达105℃，能增强杀菌作用，还可去污防锈。此法适用于食具、刀剪及载玻片等。
2.巴氏消毒法
巴氏消毒法是指温度比较低的嫌麻烦处理方法，一般在低于水沸点温度下进行。杀菌条件为61~63℃，30min，或72~75℃，10~15min。加热时应注意物料表面温度较内部温度低4~5℃；此外，当表面产生气泡时，泡沫部分难以达到杀菌要求。这种杀菌方法，由于所需时间长，生产过程不连续，长时间受热容易使某些热敏成分变化，杀菌也不够理想。
3.流通蒸汽灭菌法
流通蒸汽灭菌法，利用直接加热的流通水蒸汽杀菌微生物的方法。本法适用于瓷制、金属制、橡胶制、纤维制的物品、水、培养基和试验液等的灭菌。用干热灭菌法或高压蒸汽灭菌法，物品有变质危险，所以灭菌的时间要控制适当。
4.间歇蒸汽灭菌法
间歇蒸汽灭菌法即连续3d，每24h进行一次蒸汽灭菌，即可达到完全灭菌的目的。此法适用于不能耐100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸汽灭菌1h。灭菌温度不超过100℃，不致造成糖类等物质的破坏，而可将此期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。
5.高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌法是利用具有适当温度与压力的饱和水蒸汽加热杀灭微生物的一种方法。本法多用于耐高温高压水蒸汽物品的灭菌。为确实达到灭菌的效果，灭菌窗口中的原有空气在操作中要从排气中排除，进行灭菌时，高压蒸汽必须达到饱和，方能发挥其最大效率。

转载请注明本文地址：http://www.bjfajiao.com

• 上一篇：微生物发酵罐内换热装置的三种设计方法
• 下一篇：发酵罐实罐灭菌（实消）及设备

浏览:次  发布:2014-04-04 09:17 【关闭窗口】